在生物化學中elisa是什麼意思
樓主你好!
ELISA法指的是酶聯免疫吸附實驗 ,即將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表麵,使酶標記的抗原抗體反應在固相表麵進行的技術,可用於檢測大分子抗原和特異性抗體等,它的基本原理主要是:
采用抗原與抗體的特異反應將待測物與酶連接,然後通過酶與底物產生顏色反應,用於定量測定。測定的對象可以是抗體也可以是抗原。
在這種測定方法中有3種必要的試劑:①固相的抗原或抗體(免疫吸附劑); ②酶標記的抗原或抗體(標記物);③酶作用的底物(顯色劑)。
測量時,抗原(抗體)先結合在固相載體上,但仍保留其免疫活性,然後加一種抗體(抗原)與酶結合成的偶聯物(標記物),此偶聯物仍保留其原免疫活性與酶活性,當偶聯物與固相載體上的抗原(抗體)反應結合後,再加上酶的相應底物,即起催化水解或氧化還原反應而呈顏色。其所生成的顏色深淺與欲測的抗原(抗體)含量成正比。
希望可以對你有所幫助!
免疫組化實驗和elisa實驗有什麼區別?
兩者都是基於抗原與抗體之間能發生特異性結合這一基本原理。
免疫組化是對組織標本或細胞標本中的抗原類物質如細胞中的病原體、蛋白質、多肽、氨基酸、多糖、酶、激素、核酸等進行定位或定量檢測,檢測材料是石蠟切片或細胞塗片,檢測時用到的抗體可以用酶標記,也可以用熒光素標記。
酶聯免疫吸附試驗既可以檢測抗原也可以檢測抗體,若檢測抗體,則酶標板需要用抗原包被;若檢測抗原,則酶標板需要用抗體包被。
ELISA裏一抗和二抗的區別
二抗廣義上是指專門和一抗進行特異性反應和結合的抗體,在免疫學反應中,經常需要針對試驗選擇不同的二抗,艾美捷能為您的科研工作提供最適合和最全麵的二抗產品。檢測任何目的靶蛋白都有不止一種抗體可供選擇,同時在後繼試驗中也會有不同的檢測方案,因此在選擇二抗的時候要綜合考慮一抗的類型及後繼檢測方案的要求,一般來說,選擇合適的二抗需要從下麵幾個方麵考慮:
【一抗的種屬來源】
二抗應選用與使用的一抗相同的物種來源,例如:如果你的一抗是小鼠源的單克隆抗體,二抗則選抗小鼠的二抗(山羊抗小鼠或者兔抗小鼠等均可);如果一抗是從兔血清裏製備的兔源多克隆抗體,則相應的二抗需要選擇抗兔的二抗。即根據一抗的物種來源選擇相應的抗該物種的二抗。艾美捷能為您提供最全的抗不同種屬的原裝進口二抗,包括抗小鼠、大鼠、兔、山羊、綿羊、人、豚鼠、豬、馬、牛、雞、鴨等二抗。
【一抗的類別亞型】
二抗需與一抗的類別或亞類相匹配。這通常是針對單克隆抗體而言。多克隆抗體主要是IgG類免疫球蛋白,因此相應的二抗就是抗IgG抗體。其中單克隆抗體的類別及亞類通常會在產品說明書中都會有描述,如果你的一抗是小鼠IgM,那麼相應的二抗就應當是抗小鼠IgM。如果單克隆一抗是小鼠IgG的某一亞類(IgG1,IgG2a,IgG2b,IgG3),那麼幾乎所有的抗小鼠IgG都可以與之結合,或者你也可以選擇專門針對這一亞類的二抗,例如,如果你的一抗是小鼠IgG1,那麼你可以選擇抗IgG1的二抗,此種抗體在雙標記實驗中尤其適合。在不清楚一抗為何種類/亞類的情況下,可以選用抗相應物種IgG。艾美捷能為您提供通用的IgG(H+L)二抗,或者特異性隻結合IgM的Anti IgM (mu) Antibody、IgA的Anti IgA (alpha-Antibody、IgE的Anti IgE (epsilon) Antibody等。
【二抗的種屬來源】
一般來說,不同的種屬來源與二抗的質量沒有必然的聯係,來源於山羊的二抗與來源於驢的二抗在一般的實驗裏沒有太多的差別。然而在一些特殊的實驗裏, 如雙標實驗裏,如果其中一個一抗是山羊來源的,一個是小鼠來源的,則相應的二抗分別要抗山羊和抗小鼠的二抗,這時候,二抗就不能選擇山羊或者小鼠來源的。 艾美捷有相應的驢來源的二抗,非常適合做類似雙標的免疫實驗。
【二抗的耦聯標記】
一般來講,耦聯到二抗上的探針主要有酶(辣根過氧化酶HRP和堿性磷酸酶AP或其衍生物APAAP,PAP),熒光基團(FITC、 Rhodamine、Texas Red、PE、Rhodamine、Dylight等)、生物素、金顆粒。選用哪種探針的二抗主要取決於具體的實驗。對於Western Blot和ELISA,最常用的二抗是酶標二抗;而細胞或組織標記實驗(細胞免疫化學,組織免疫化學,流式細胞術)中通常使用熒光基團標記的二抗,免疫組化中也可以使用辣根過氧化酶或堿性磷酸酶標記的二抗。如果想要更大程度的放大檢測信號,可以使用Biotin/Avidin檢測係統。在一些熒光檢測方案中,則需要選擇不同的熒光標記;而金顆粒標記的二抗則更多的應用於免疫電鏡中。艾美捷能為您提供上述所有不同類型標記的二抗。
【是否經過血清吸附過的二抗】
為減少二抗與樣本的非特異性結合,艾美捷還能為您提供不同血清吸附的原裝進口二抗。如您的檢測樣本是人源的蛋白,一抗是小鼠源的單克隆抗體,二抗就需要選擇抗小鼠源的二抗,如果您對實驗的特異性要求很高,那我們向您推薦經過人血清吸附過的抗小鼠源的二抗,這種二抗由於經過人血清吸附而排除了與人源組織(如IgG等)可能發生非特異性反應的IgG,因此將非特異性結合降低到最低。
【Anti-IgG還是Anti-IgG, F(ab’)2 fragment】
在一些如胸腺、脾髒、血液的組織以及造血細胞、淋巴細胞、B細胞等細胞內,通常含有較多的Fc受體,這時候選擇二抗時最好選擇Anti-IgG, F(ab’)2 fragment這樣的特異性二抗,這樣就消除了由於Fc部分與IgG的非特異性結合。常規的Anti-IgG (H+L)二抗與IgG的重鏈和輕鏈都有結合反應,即與IgG的Fc的F(ab’)2片段都能結合;由於IgG、IgM、IgA都有保守的輕鏈結構域,因此Anti-IgG (H+L)與它們都有交叉反應。而Anti-IgG, F(ab’)2 fragment經過了IgG Fc片段的吸附,因此隻與IgG的F(ab’)2片段結合,然而IgG、IgM、IgA都有保守的輕鏈結構域,因此與它們也有交叉反應。
【Anti-IgG(H+L)、Anti-IgG (gamma)、Anti-IgM (mu)、Anti-IgA (alpha)】
在一些特殊的實驗裏,隻需要檢測樣本裏的IgG或者IgM,常規的Anti-IgG (H+L)由於與IgG的重鏈和輕鏈都有結合反應,而IgG、IgM、IgA都有保守的輕鏈結構域,因此不能特異性的檢測某種類型的IgG或者IgM。這時候就需要針對特殊類型Ig分子的二抗。艾美捷備有全麵的二抗現貨產品並能提供最完整的二抗產品線。
什麼是ELISA?
Elisa技術(enzyme-linked immuno sorbent assay酶聯免疫吸附測定)
ELISA 的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表麵的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表麵的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體複合物與液體中的其他物質分開。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物後,底物被酶催化成為有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。由於酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應的結果,使測定方法達到很高的敏感度。 ELISA可用於測定抗原,也可用於測定抗體。
試劑盒檢測原理
ELISA檢測試劑盒應用定性夾心免疫檢測技術,用合成的HEV(Hepatitis E virus戊型肝炎病毒)多肽抗原包被微孔板板條,這些多肽是中國型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很強的肽段,分別來自於該毒株的開放閱讀框2和開放閱讀框3。將樣品或標準品加入孔中並孵育,如果其中存在HEV IgM抗體,這些抗體就會與HEV 的多肽抗原結合,並固定在上麵,洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。然後加入羊抗人IgM-HRP(辣根過氧化物酶)酶結合物,經第二次孵育後,酶結合物就會與第一次孵育結合上的HEV IgM抗體相結合,洗板除去未結合的酶結合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育時會發生酶-底物反應,隻有那些含有HEV IgM抗體和酶結合物所形成的複合物的孔才會發生顏色變化,加入硫酸溶液終止酶和底物間的反應,並在波長: 450nm處測量O.D.值,按照本HEV IgM抗體elisa試劑盒的測試標準, O.D.值大於或等於Cut-Off值的樣品被認為是初試陽性。
elisa是免疫組織化學技術嗎
免疫組化,是應用免疫學基本原理——抗原抗體反應,即抗原與抗體特異性結合的原理,通過化學反應使標記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色來確定組織細胞內抗原(多肽和蛋白質),對其進行定位、定性及相對定量的研究,稱為免疫組織化學技術(immunohistochemistry)或免疫細胞化學技術(immunocytochemistry)。
elisa(酶聯免疫吸附試驗)
用到了免疫學原理和化學反應顯色,待測的樣品多是血清、血漿、尿液、細胞或組織培養上清液,因而沒有用到組織包埋、切片等技術,這是與免疫組化的主要區別,操作上 開始需要將抗原或抗體結合到固相載體表麵,從而使後來形成的抗原-抗體-酶-底物複合物粘附在載體上,這就是“吸附”的含義。
免疫組化和elisa所用到的原理 大致相同,隻是因為所檢測的樣品不同,從而在操作方法上有所不同。Elisa多用於定量分析,其靈敏度非常高。
放射性免疫分析與elisa有什麼區別
主要是標記物不同(放射性物質/酶),其他的差不太多
梅毒螺旋體抗體.ELISA.是什麼意思
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梅毒螺旋體抗體:是梅毒螺旋體侵入人體後,在血清中可出現特異性抗體,是梅毒感染和監測的主要標誌。
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ELISA:酶聯免疫吸附測定enzyme?linked?immunosorbent?assay(簡寫ELISA)指將可溶性的抗原或抗體結合到聚苯乙烯等固相載體上,利用抗原抗體結合專一性進行免疫反應的定性和定量檢測方法。酶聯免疫吸附測定(ELISA)為免疫學中的經典實驗,本詞條從定義、基本原理、分類方法、操作要點等方麵對其進行了詳細介紹。
免疫印跡與elisa和western blot有什麼區別,似乎原理差別不大,誰能細致說說
酶聯免疫吸附實驗(ELISA) ,蛋白質印跡法(免疫印跡試驗)即Western Blot
都是抗原與抗體的特異反應將待測物與酶連接,然後通過酶與底物產生顏色反應,用於定量測定。
原理都是靠免疫學的抗原抗體結合,二抗上帶酶,通過與底色反應顯色。區別的話WB所檢測的一般是抗原,而Elisa抗原抗體都可以檢測。WB隻能用抗體去檢測你的蛋白樣品。ELISA可以固定抗原也可以固定抗體。WB所檢測的抗原可以知道其分子量的大小,或是否是多聚體、降解產物等,一句話,WB可以確定所用抗體是與那種蛋白起作用的;而Elisa無能為力,一鍋端了。
二點酶免疫法是不是就是elisa
二點酶免疫法我不清楚這個名稱 但是
酶聯免疫法一定就是elisa啦 因為酶聯免疫吸附測定enzyme linked immunosorbent assay(簡寫ELISA)所以elisa是簡稱也是一般大家都這麼叫
檢測標準中oieelisa wp ss是什麼意思
檢測自身抗體的方法有多種,包括間接免疫熒光法、顆粒凝集法、酶聯免疫吸附試驗、放射免疫法、免疫雙擴散法、參比對流免疫電泳法、免疫印跡法、免疫斑點法、膠體金標斑點免疫滲濾法以及速率免疫比濁法等,間接免疫熒光法即適用於檢測針對原位成分也適用於可溶性成分的抗體,其餘各法均適用於針對可溶性成分的抗體,可根據臨床需要及醫院條件去選用。以下介紹常用的幾種。(1)間接免疫熒光法(IIF)這是進行抗核抗體、抗核仁抗體和抗胞漿抗體篩選檢測的最有效方法。在些檢測係統中,以組織培養細胞和器官的冷凍片切為反應底物。(2)免疫雙擴散法(ID)免疫雙擴散法過去稱為“Ouchterlony試驗”是最早用於鑒定係統性自身免疫性疾病中自身抗體特異性的檢測係統。在這些係統中,瓊脂凝膠是血清中抗體擴散從相反方向擴散過來的抗原相遇的介質,在抗原與抗體間形成沉澱線。鑒定抗原抗體係統時需標準參照血清。當二者相同時,兩條沉澱線在瓊脂凝膠上形成一條連續的沉澱線。免疫擴散中形成的沉澱線可用來鑒定如抗Sm、RNP、SS-B抗體係統及許多前述的可沉澱性抗原抗體係統。
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